Mikroskopická imunodetekce v biomedicíně Teoretický kurz pořádá Československá mikroskopická společnost, KRD, s.r.o. a ÚMG AV ČR, v.v.i. Praha, čtvrtek 4. listopadu 2010 |
Organizátoři: Prof. P. Hozák (CSMS a ÚMG; hozak@img.cas.cz) a Mgr. V. Krivjanský (KRD; viktor@krd.cz) Místo konání: posluchárná v přízemí nové budovy Ústavu molekulární genetiky, v.v.i., Vídeňská 1083, Praha 4 (spojení: od M. Budějovická před poliklinikou autobusem 193 na konečnou) Účastnický poplatek (zahrnuje oběd a občerstvení o přestávkách): 400 Kč pro akademickou sféru - členy CSMS 500 Kč pro akademickou sféru - nečleny CSMS 1000 Kč pro neakademickou sféru informace a přihlášky: p. Lenka Pišlová, lab25secretary@img.cas.cz, tel./fax 241 062 289 |
|
||
Program |
||
čas | téma a přednášející | anotace |
8:00 - 9:00 | Registrace | - |
9:00 - 9:15 | Úvod - Hozák | - |
9:15 - 10:00 | Principy fluorescenční mikroskopie a konstrukce mikroskopů – Hozák | Základní pojmy: antigen, fluorochrom, excitační a emisní spektra. Schéma imunoznačení. Konstrukce fluorescenčního mikroskopu: konvenční, konfokální jedno- a vícefotonový, filtry, bloky. Výběr odpovídající metody |
10:10 - 10:55 | Protilátky – Halbhuber |
Teorie: typy, původ, třídy. Praktické rady: čistota, dostupnost a vhodnost pro IFM, skladování, ředění. |
10:55 - 11:25 | Přestávka | - |
11:25 - 12:10 | Fluorochromy a příprava konjugátů, nové produkty – Onderková | Metody detekce antigenů. Přehled
používaných fluorochromů a jejich vlastností. Principy značení
protilátek. Nové progresivní produkty, dostupné komerčně. |
12:20 - 13:05 | Histochemie v procházejícím světle – Jirásek | Fixace tkání pro imunohistochemii, protokoly a příprava tkání proimunohistochemii, metodické problémy a jejich řešení |
13:05 - 13:55 | Oběd | zajištěno
na místě |
13:55 - 14:40 | Fluorescenční imunohistochemie – Jirásek | Typy a vliv fixací, kryořezy, protokoly a příprava tkání pro fluorescenční imunohistochemii, kontrolní preparáty, metodické problémy a jejich řešení, demonstrace probíraných metod na konkrétních příkladech |
14:50 - 15:35 | Imunofluorescence na tkáňových kulturách a techniky barvení pozadí, nově zaváděné postupy – Hozák | Základní postupy
imunofluorescence při práci s kulturami. Vliv fixace na značení.
Techniky barvení pozadí – DNA, celé buňky, barvení živých buněk.
Diskutovány budou vznikající progresivní techniky imunodetekce
(tetracysteinové značky, fotokonverze, korelační světelná a elektronová
mikroskopie) |
15:45 - 16:30 | Digitální fotodokumentace – Benada | Základní charakteristiky digitálních obrazových souborů. Práce s obrázky – úpravy beze ztráty kvality, příprava do publikace. |
16:30 - 17:00 | Závěrečná diskuse |
Přednášející: RNDr. Oldřich BENADA, CSc.: Vede skupinu elektronové mikroskopie MBÚ AV ČR. Obecně se zabývá se elektronovou mikroskopií v mikrobiologii (TEM, SEM, STEM) a specializuje se na makromolekuly a makromolekulární komplexy. Publikoval přes čtyřicet originálních článků včetně časopisů EMBO Journal, Molecular Human Genetics, Microscopy Research and Technique. Je členem výboru Československé mikroskopické společnosti. Další informace: http://www.biomed.cas.cz/mbu/ Kontakt: benada@biomed.cas.cz |
|
Mgr. Radek Blatný Vědecký
pracovník v laboratoři firmy Central European Biosystems, která slouží
jako servisní pracoviště pro analýzy v oblasti funkční genomiky (PCR,
DNA microarray). V letech 2002 až 2004 pracoval ve firmě BNT
BioMolecular Therapeutics ve Vídni na vývoji imunologických
terapeutik založených na rekombinantních proteinech.
Kontakt: radek.b@cebiosys.com |
|
Prof.
RNDr. Pavel HOZÁK, DrSc.: vede Oddělení biologie buněčného jádra ÚMG AV ČR, přednáší na Universitě Karlově. Zabývá se zejména biologií buněčného jádra, regulací genové exprese a vývojem nových mikroskopických technik. Publikoval více než šedesát originálních článků včetně časopisů Cell, Science, Nature Cell Biology. Je předsedou Československé mikroskopické společnosti, předsedou evropské Society for Histochemistry a členem výboru European Microscopy Society. Další informace: http://nucleus.img.cas.cz Kontakt: hozak@img.cas.cz |
|
As.
MUDr. Tomáš JIRÁSEK, Ph.D.: odborný asistent Ústavu patologie 3. lékařské fakulty UK a FNKV. Věnuje se problematice imunohistologie, fluorescenční a konfokální mikroskopie především v oblasti neuroendokrinní diferenciace a patologie trávicího traktu. Kontakt: tjirasek@fnkv.cz |
|