Pokroky ve fázově-kontrastní mikroskopii (Neuromethods 2017)
Difrakční jevy zodpovědné za tvorbu obrazu v mikroskopu využíváme ke zvýšení účinnosti fázově-kontrastní mikroskopie.
Difraktogramy vysoce periodických objektů (B) jsou zřetelně patrné v zadní ohniskové rovině objektivu (výřezy v A a B).
A. Bez difraktujících objektů v zorném poli je viditelná pouze kondensorová (osvětlovací) clona.
B. Periodicky uspořádaná žebra tělních šupin rybénky cukrové (Lepisma saccharina). V závislosti na jejich hustotě (prostorové frekvenci) a orientaci je centrální světlý prstenec (obraz kondensorové clony) rozštěpen do několika excentricky umístěných prstenců.
C. Živé neobarvené epiteliální buňky z ústní sliznice autora (RP). Apodizovaná fázově-kontrastní mikroskopie (kterou vynalezl Tatsuro Otaki 1999) zmírňuje ‘halo‘ artefakty, ale u opticky tenkých buněk také snižuje obrazový kontrast.
Popisujeme i další technická řešení (modifikace optické sestavy) vhodná pro různé typy buněk.
Upraveno podle:
Pelc R., Hostounský Z., Otaki T. & Katoh K. (2017 v tisku) Conventional, apodized and relief phase-contrast microscopy. In: Neurohistology & Imaging: Basic Techniques (Pelc R., Doucette J.R. & Walz W., Eds.), pp. XXX-XXX. Springer (Humana Press), New York (the NEUROMETHODS series, vol. XX)
© 2014 Fyziologický ústav AV ČR