Zástupce vedoucího oddělení:
Doc. RNDr. Eva Kmoníčková, CSc.
E-mail: kmonickova@biomed.cas.cz
Tel.: +420 241 062 720

Vědečtí pracovníci:
Doc. RNDr. Eva Kmoníčková, CSc.
MUDr. Miloslav Kverka, Ph.D.
RNDr. Zdeněk Zídek, DrSc.

Postgraduální studenti:
Mgr. Adéla Dusilová
Ing. Petra Kostecká

Techničtí pracovníci:
Mgr. Jana Křížková
Eva Prchlíková

1. Vývoj nových typů imunofarmak

Zjistili jsme, že seskviterpenové laktony přírodního původu, thapsigargin (Tg) a trilobolid (Tb) mají imunostimulační aktivitu. U Tg byly pozorovány protinádorové účinky. Studie popisuje metodu umožňující detekci průniku látek do buněk a jejich vnitrobuněčnou distribuci. Nalezli jsme, že ke zvýšené koncentraci Tb dochází v endoplasmatickém retikulu různých nádorových buněk. Výsledky jsou racionálním východiskem pro cílenou syntézu biologicky účinných derivátů a jejich farmakologický výzkum.

Lokalizace SERCA inhibitoru trilobolidu v nádorových buňkách. Přítomnost trilobolidu v buňkách lidského osteosarkomu (U-2 OS; horní řádka) a karcinomu prostaty (PC-3; dolní řádka) byla detegována pomocí jeho konjugace s „Bodipy“ (A+D; zeleně). Endoplasmatické retikulum nádorových buněk je zvýrazněno červeně (B+E). Překrytím obrázků (C+F) je dokumentována akumulace trilobolidu v endoplasmatickém retikulu.

Spolupráce: VŠCHT Praha 

Publikace: 
Jurášek, M., Rimpelová, S., Kmoníčková, E., Drašar, P., Ruml, T.: (2014) Tailor-made fluorescent trilobolide to study its biological relevance. J. Med. Chem. 57(19): 7947-7954. IF=5.480.

2. Nové látky s protizánětlivými vlastnostmi

Byly syntetizovány zcela nové deriváty pyrimidinu. Analyzovali jsme jejich imunobiologické vlastnosti a zjistili jsme, že v závislosti na chemické struktuře inhibují produkci mediátorů zánětu, jakými jsou oxid dusnatý a prostaglandin E2. Jsou dobře tolerované, bez známek toxického působení na buňky. Originální deriváty pyrimidinu je možné považovat za vhodné kandidáty pro další preklinický výzkum, a to v oblasti chronických zánětlivých onemocnění.
 

Závislost inhibičních účinků pyrimidinů na jejich chemické struktuře. A. C4,6-hydroxylové deriváty pyrimidinu postrádají inhibiční aktivitu. B.Ke snížené produkci oxidu dusnatého (NO) a prostaglandinu E2 (PGE2) dochází po substituci hydroxylových skupin za chlor. C. Inhibiční aktivita dále vzrůstá náhradou 2-amino skupiny za např. (dimethylamino)methylenamino skupinu. D. Koncentrace, které snižují produkci NO o 50% (IC50) jsou přibližně 5 µM.

Spolupráce: ÚOCHB, AV ČR 

Publikace: 
Jansa, P., Holý, A., Dračínský, M., Kolman, V., Janeba, Z., Kostecká, P., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: (2014) 5-Substituted 2-amino-4,6-dihydroxypyrimidines and 2-amino-4,6-dichloropyrimidines: synthesis and inhibitory effects on immune-activated nitric oxide production. Med. Chem. Res. 23(10): 4482-4490. IF=1.612
Jansa, P., Holý, A., Dračínský, M., Kolman, V., Janeba, Z., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: (2014) Synthesis and structure–activity relationship studies of polysubstituted pyrimidines as inhibitors of immune-activated nitric oxide production. Med. Chem. Res., DOI: 10.1007/s00044-014-1285-5. IF=1.612

Výzkum a vývoj protizánětlivých léčiv – deriváty pyrimidinu

Ve vývoji nových léčiv zaujímají významné postavení nízkomolekulární látky typu pyrimidinových derivátů. Analyzovali jsme velké množství nově syntetizovaných originálních struktur z hlediska jejich vnitřních imunobiologických vlastností. V závislosti na chemické struktuře jsme u nich nalezli schopnost inhibovat produkci prostaglandinů, oxidu dusnatého a cytokinů. Na základě těchto výsledků jsme přistoupili ke sledování jejich protizánětlivých účinků, a to v experimentálních modelech lidských onemocnění, jako jsou ulcerózní kolitida a revmatoidní artritida. In vivo pokusy potvrdily předpoklad o protizánětlivé aktivitě některých derivátů v těchto podmínkách.

  

Řada pyrimidinových analogů snižuje velmi výrazně produkci mediátorů zánětu, oxidu dusnatého (NO) a prostaglandinu E2. Testy byly provedeny v podmínkách in vitro u myších makrofágů. Koncentrace, které inhibovaly produkci těchto faktorů o 50% (IC50) se pohybovaly v rozmezí od 2 µM do 10 µM. Předností látek je, že nevykazují žádnou cytotoxickou aktivitu.

 

Pyrimidinové deriváty mají příznivý terapeutický efekt na rozvoj experimentální kolitidy, indukované u myší pomocí dextran sulfátu. Snížení tíže onemocnění se vyrovná účinku obvyklého standardu, klinicky používaného sulfasalazinu.

 

Spolupráce: ÚOCHB Praha

Publikace: 

Harmatha, J., Buděšínský, M.,, Vokáč, K., Kostecká, P., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: Trilobolide and related sesquiterpene lactones from Laser trilobum possessing immunobiological properties. Fitoterapia, 89C: 157-166, 2013. IF 2.231.
Jansa, P., Holý, A., Dračínský, M., Kolman, V., Janeba, Z., Kostecká, P., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: 5-Substituted 2-amino-4,6-dihydroxypyrimidines and 2-amino-4,6-dichloropyrimidines: synthesis and inhibitory effects on immune-activated nitric oxide production. Medicinal Chemistry Research, IF 1.612.

TAČR: TE01020028, Centrum vývoje originálních léčiv - CVOL, 2012-2019

GAČR: P303/12/0172, Studie vztahu mezi strukturou a imunosupresivní aktivitou pyrimidinových analogů, 2012-2016

GAČR: P303/12/0535, Mechanismy ovlivnění zánětu, metabolismu a farmakokinetiky léčiv komenzálními a probiotickými baktériemi, 2012-2016

2016

Coufal,Š., Kokešová, A., Tlaskalová-Hogenová, H., Snajdauf, J., Rygl, M., Kverka, M.: (2016) Urinary Intestinal Fatty Acid-Binding Protein Can Distinguish Necrotizing Enterocolitis from Sepsis in Early Stage of the Disease. J Immunol. Res., 5727312.

Heissigerová, J., Seidler Stangová, P., Klimová, A., Svozilková, P., Hrnčíř, T., Štěpánková, R., Kverka, M., Tlaskalová-Hogenová, H., Forrester, J.V.: (2016) The Microbiota Determines Susceptibility to Experimental Autoimmune Uveoretinitis. J Immunol. Res., 5065703.

Huml, L., Jurášek, M., Mikšátková, P., Zimmermann, T., Tomanová, P., Buděšínský, M., Rottnerová, Z., Šimková, M., Harmatha, J., Kmoníčková, E., Lapčík, O., Drašar, P. B.: (2016) Immunoassay for determination of trilobolide. Steroids, Sep 4. pii: S0039-128X(16)30115-5. doi: 10.1016/j.steroids.2016.08.019. IN PRESS

Jurášek, M., Džubák, P., Rimpelová, S., Sedlák, D., Konečný, P., Frydrych, I., Gurská, S., Hajdúch, M., Bogdanová, K., Kolář, M., Müller, T., Kmoníčková, E., Ruml, T., Harmatha, J., Drašar, P.B.: (2016) Trilobolide-steroid hybrids: Synthesis, cytotoxic and antimycobacterial activity. Steroids, IN PRESS

Zákostelská, Z., Málková, J., Klimešová, K., Rossmann, P., Hornová, M., Novosádová, I., Stehlíková, Z., Kostovčík, M., Hudcovic, T., Štepánková, R., Jůzlová, K., Hercogová, J., Tlaskalová-Hogenová, H., Kverka, M.: (2016) Intestinal Microbiota Promotes Psoriasis-Like Skin Inflammation by Enhancing Th17 Response. PLoS One, 11(7): e0159539.

Zídek, Z., Kverka, M., Dusilová, A., Kmoníčková, E., Jansa, P.: (2016) Dual inhibition of nitric oxide and prostaglandin E2 production by polysubstituted 2-aminopyrimidines. Nitric Oxide-Biol. Chem., 57: 48-56.

2015

Du, Z., Hudcovic, T., Mrázek, J., Kozaková, H., Srutková, D., Schwarzer, M., Tlaskalová-Hogenová, H., Kostovcik, M., Kverka, M.: (2015) Development of gut inflammation in mice colonized with mucosa-associated bacteria from patients with ulcerative colitis. Gut Pathog. 7:32.

Harmatha, J., Vokáč, K., Buděšínský, M., Zídek, Z., Kmoníčková, E.: (2015) Immunobiological properties of sesquiterpene lactones obtained by chemically transformed structural modifications of trilobolide. Fitoterapia. 107: 90-99.

Jansa, P., Holý, A., Dračínský, M., Kolman, V., Janeba, Z., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: (2015) : Synthesis and structure–activity relationship studies of polysubstituted pyrimidines as inhibitors of immune-activated nitric oxide production. Med. Chem. Res., 24: 2154-2166.

Li, Y. J., Guo, Y., Yang, Q., Weng, X. G., Yang, L., Wang, Y. J., Chen, Y., Zhang, D., Li, Q., Liu, X. C., Kan, X. X., Chen, X., Zhu, X. X., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: (2015) Flavonoids casticin and chrysosplenol D from Artemisia annua L. inhibit inflammation in vitro and in vivo. Toxicol. Appl. Pharmacol., 286 (3): 151-158.

Potměšil P., Holý A., Zídek Z.: (2015) Influence of acyclic nucleoside phosphonate antivirals on gene expression of chemokine receptors CCR5 and CXCR4. Folia Biologica (Praha), 61: 1-7

2014

Jansa, P., Holý, A., Dračínský, M., Kolman, V., Janeba, Z., Kostecká, P., Kmoníčková, E., Zídek, Z.: (2014) 5-Substituted 2-amino-4,6-dihydroxypyrimidines and 2-amino-4,6 dichloropyrimidines: synthesis and inhibitory effects on immune-activated nitric oxide production. Med. Chem. Res. 23: 4482-4490.

Zídek, Z., Jansa, P., Kmoníčková, E.: (2014) Activation of respiratory complex II by interferongamma and its inhibition by pyrimidine derivatives. Neuroendocrinol. Lett. 35 (Suppl.2): 141-148.

Jurášek, M., Rimpelová, S., Kmoníčková, E., Drašar, P., Ruml, T.: (2014) Tailor-made fluorescent trilobolide to study its biological relevance. J. Med.Chem. 57(19) 7947-7954.

Nekvindová, J., Contreras, J. A., Juvan, P., Fon Tacer, K., Anzenbacher, P., Zídek, Z., Kopečná-Zapletalová, M., Rozman, D., Anzenbacherová, E.: (2014) Acyclic nucleoside phosphonates: a study on cytochrome P450 gene expression. Xenobiotica. 44(8): 708-715.

Patent:

Pyrimidine compounds inhibiting the formation of nitric oxide and prostaglandin E2, method of production thereof and use thereof

Patent Assignee: Ustav Organicke Chemie a Biochemie Akademie Ved CR VV I; Ustav Experimentalni Mediciny Akademie Ved CR VV I

Inventor(s): Jansa, Petr; Holy, Antonin; Zidek, Zdenek; et al.

Official Gazette of the United States Patent and Trademark Office Patents Published: NOV 11 2014

Ústav organické chemie a biochemie AV ČR, Praha

Mikrobiologický ústav AV ČR, Praha