Hybridizační metody studia nukleových kyselin
Hybridizační metody studia nukleových kyselin patří mezi základní techniky molekulární biologie. V článku jsou přiblíženy principy hybridizace nukleových kyselin a popsány rozdíly mezi jednotlivými metodami (Southernův přenos u DNA, „northernový“ přenos u RNA).
str. 44
Analýza exprese kvasinkového genu TIP1 metodou northern blot. Celková RNA byla po izolaci z buněk rozdělena na elektroforéze (levá část obrázku). Nahoře jsou dobře patrné pruhy ribozomální RNA, v dolní části méně zřetelné pruhy malých buněčných RNA. Molekuly mRNA jsou různě dlouhé a tvoří pouze část celkové RNA, takže není možné rozeznat pruhy jednotlivých mRNA (šipka označuje přibližné místo výskytu TIP1 mRNA). Pomocí techniky northern blot je možné zobrazit pruh konkrétní mRNA a získat informace o jejím množství (pravá část obrázku). V případě analýzy exprese genu TIP1 je vidět, že s přibývajícím stářím kvasinkových buněk (zleva doprava – 3, 4, 5, 7 a 10 dní) postupně klesá množství jeho mRNA (výsledky laskavě poskytl V. Šťovíček). Orig. M. Kuthan