Analytické metody - stanovení rostlinných hormonů
Podobně jako v jiných oblastech výzkumu je pokrok poznání hormonálních regulací růstu a vývoje rostlin závislý na zdokonalení existujících a vývoji nových metod výzkumu. Pro tento účel byla v naší laboratoře zřízena samostatná analytická jednotka, která se věnuje zejména rozvoji moderních metod identifikace a stanovení rostlinných hormonů, jakož i sledování dynamiky jejich biosyntézy a metabolických přeměn.
V jejím rámci byla vyvinuta nová rychlá metoda extrakce a čištění různých skupin rostlinných hormonů a některých dalších biologicky aktivních látek ze společného výchozího vzorku rostlinného materiálu pro jejich následné kvantitativní stanovení (Dobrev and Kamínek, J. Chrom.A 2002, Dobrev et al., J. Chrom.A 2005 a Hoyerová et al., Phytochemistry 2006). Citlivost a operativnost této metody umožnily její rychlé rozšíření a využití.
Pro stanovení rostlinných hormonů byla poprvé použita metoda využívající dvourozměrné vysoce účinné kapalinové chromatografie, která umožňuje sériové „on line“ stanovení auxinu a kyseliny abscisové pomocí detektorů diodového pole a fluorescence (Dobrev et al., J. Chrom.A 2005) v komplexních rostlinných matricích.
Pro urychlení a zpřesnění studia klíčových enzymů zapojených do metabolismu fytohormonů byly zdokonaleny metody stanovení aktivit cytokininoxidázy/dehydrogenázy (Dobrev a Motyka, Biologické Listy 2003), zeatinreduktázy (Gaudinová et al., J. Plant Growth Regul. 2005) a cytokininglukosyltransferázy (Polanská et al., Biotechnology Letters 2004).
Metabolický profil radioaktivního trans-zeatinu v buňkách tabáku.
Laboratoř se též zabývá „metabolickým profilováním“ a stanovením metabolických přeměn značených rostlinných hormonů a dalších biologicky aktivních látek. Příslušné metody jsou rovněž využívány pro stanovení rychlosti příjmu značených látek rostlinnými buňkami.